Экспериментальное заражение пчел

Экспериментальное заражение насекомых. 1. Приготовить материал и опытных насекомых для заражения. 2. Заразить насекомых.

Оборудование и материалы: живые взрослые пчелы, 1%-ный раствор йода, ватные тампоны на спичках, иглы в иглодержателях, стерильные фарфоровые ступки, пинцеты, марлево-ватные фильтры в маленьких воронках, стерильный физраствор в пробирках, спиртовки, стерильные пастеровские пипетки, набор красящих растворов, обезжиренные предметные стекла, микроскопы, эксгаустер.

Подготовка материала и опытных, насекомых для заражения. Опытные заражения пчел или других насекомых позволяют определить заразительность болезни и патогенность микроба и изучить длительность и симптомы (признаки) экспериментально вызванной болезни. Подопытных насекомых заражают чистой культурой микроорганизма или патологическим материалом.

Патологический материал берут от больных пчел (трупы или органы пчел, личинки) или других насекомых (шелкопряды, восковая моль, жуки-кожееды и др.), заливают небольшими порциями стерильного физраствора, тщательно растворяют в стерильной фарфоровой ступке, фильтруют через марлево-ватный фильтр. Полученным фильтратом заражают насекомых.

Чистую культуру микроба перед заражением смывают с плотной среды физраствором, разбивают стерильной бактериологической петлей комочки, встряхивают, в случае надобности фильтруют. Фильтрат используют для заражения.

В зависимости от поставленных задач для опытных заражений берут полноценные пчелиные семьи, небольшие семьи только одних взрослых пчел или одних пчелиных личинок. Пчел отбирают эксгаустером.

Часто заражают и другие виды насекомых. В полноценных семьях предварительно учитывают силу семьи, возраст матки, количество расплода, сотов, меда, перги.

Чаще создают для опытных целей небольшие пчелиные семьи (в улейках на 1/4 рамки) из 100 или 200 г молодых пчел и 1 — 2-дневных личинок в сотах. Нередко берут для тех же целей группы взрослых пчел (10, 20 или 50 г) определенного возраста (однодневных, нелетных, летных), сажают их в картонные цилиндры размером 10×10 см и ставят на стеклянное дно; верх цилиндра закрывают марлей, которую в натянутом виде прихватывают резиновым кольцом. Кормят пчел сиропом или медом.

Личинок медоносной пчелы выращивают при температуре 3—4°С и относительной влажности 75—85%. Содержат личинок индивидуально на часовом стекле или в чашках Петри. На дно чашки Петри кладут слой гигроскопической ваты толщиной 3—4 мм. Вату пропитывают раствором, содержащим 25% меда и 10% сухого экстракта дрожжей. Вату покрывают сверху слоем марли, которую плотно прижимают к вате. Сверху марли кладут личинок рабочих пчел в возрасте 3—5 дней. Марля предохраняет личинок от погружения в жидкость. Личинки, поедая такую питательную среду, быстро растут. Наиболее благоприятным кормом для личинок служит маточное молочко, которое хранят в холодильнике. Личинок с помощью платиновой петли через каждые 2 ч кормят. Маточное молочко кладут возле личинки.

Других насекомых (гусеницы восковой моли, шелкопряды и пр.) содержат в энтомологических садках и дают им соответствующий корм.

Во всех случаях, кроме подопытных групп насекомых, создают такие же контрольные группы. Им вместо испытуемого материала дают или вводят физраствор. Содержатся они в тех же условиях, что и подопытные.

Заражение насекомых. Применяют разные способы заражения, а именно: алиментарный — с кормом, к которому добавляют фильтрат патологического материала или смывы чистой культуры микроорганизма; респираторный (respiratio — дыхание) — через органы дыхания и покровные ткани, путем опрыскивания из пульверизатора фильтратом или смывом культуры; парентеральный (минуя кишечник) — в полость тела вводят патологический материал тонкой иглой или пипеткой через межсегментарные перепонки. Место введения до и после операции смазывают миниатюрным влажным тампоном, смоченным 1%-ной йодной настойкой.

За зараженными и контрольными насекомыми ведут регулярные наблюдения. Интервалы между наблюдениями могут быть различными в зависимости от быстроты развития привитой болезни. При быстро протекающей болезни наблюдения ведут через 2—3 ч, а при хронической, длящейся неделями, — один раз в сутки. При осмотрах отмечают поведение насекомых, их вид, сроки гибели, расходование и пополнение корма и пр. Одновременно отмечают окружающую температуру и влажность.

На ход и развитие инфекции среди насекомых сильное влияние оказывают температурные условия и влажность. Поэтому часто подопытные и контрольные пары содержат при разных температурах и разной относительной влажности. Обычно повышение температуры и относительной влажности способствует развитию инфекционной болезни.

 

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *